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細胞凋亡檢測
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細胞凋亡檢測
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細胞凋亡檢測

一、細胞凋亡檢測

通過帶熒光標記的Annexin V檢測各個樣品的凋亡情況

二、原理

細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。Annexin V是一種易于結合到磷脂類如PS的蛋白,可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面。PS轉移到細胞膜外不是凋亡所獨特的,也可發生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的,而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就破壞了。因此,可建立一種用Annexin V結合在細胞膜表面作為凋亡的指示并結合一種染料(如PI、DAPI、7-AAD等)排除試驗以檢測細胞膜的完整性的檢測方法。

三、細胞凋亡服務流程

  收集細胞,洗滌、懸浮細胞;

  加Annexin V-EGFP(或其它)及PI(或其它)混勻,避光、反應;

  熒光顯微鏡、激光共聚焦或流式細胞儀觀察和檢測。



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